提高磷酸鈣轉(zhuǎn)染法效率的共通步驟,食品級(jí)磷酸鈣多少錢(qián),目的都是為了避免產(chǎn)生會(huì)被細(xì)胞內(nèi)吞、加工失效的大顆粒沉淀。
提高轉(zhuǎn)染效率的操作有以下這些:
1、將小分子DNA整合在高分子質(zhì)量基因組DNA上,以大分子作為運(yùn)載體,能提高轉(zhuǎn)染效率。
2、測(cè)試緩沖液適合的ph,可制備幾批pH范圍為6.90~7.15的HEPES鹽緩沖液,分別測(cè)試緩沖效率,找到適pH值。
3、使用轉(zhuǎn)染促進(jìn)劑,如甘油、氯喹、其他可購(gòu)買(mǎi)的轉(zhuǎn)染促進(jìn)劑。因?yàn)檫@些試劑對(duì)細(xì)胞有一定毒性,飼料級(jí)磷酸鈣多少錢(qián),因此,應(yīng)針對(duì)每種細(xì)胞系通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定轉(zhuǎn)染促進(jìn)劑處理的佳時(shí)機(jī)、時(shí)長(zhǎng)和強(qiáng)度。
除了這些共通的步驟,飼料級(jí)磷酸鈣多少錢(qián),不同廠(chǎng)家還會(huì)對(duì)混勻DNA和磷酸鈣的速度有要求。有些方法要求只能輕輕攪動(dòng),有些建議用移液器溫和吹吸混勻,有些則提倡應(yīng)緩慢混合。
因此,在使用磷酸鈣轉(zhuǎn)染時(shí),應(yīng)針對(duì)不同試劑和細(xì)胞系,耐心調(diào)整實(shí)驗(yàn)參數(shù),才是獲得高轉(zhuǎn)染效率的關(guān)鍵。
磷酸鈣(calcium phosphate,tribasic),化學(xué)結(jié)構(gòu)本品為不同形式磷酸鈣組成的混合物。不溶于乙醇和,微溶于水,易溶于稀鹽酸和??梢杂米骺菇Y(jié)劑、酸度調(diào)節(jié)劑、營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑、增香劑、穩(wěn)定劑、水分保持劑。
物理性質(zhì)外觀(guān)與性狀:白色、無(wú)臭、無(wú)味的晶體或無(wú)定形粉末。磷酸鈣紅外圖譜熔點(diǎn)(℃):1391相對(duì)密度(水=1):3.18溶解性:不溶于水,不溶于乙醇、,溶于酸。? InChI=1/3Ca.2H3O4P/c;;;2*1-5(2,3)4/h;;;2*(H3,1,2,3,4)/q3*+2;;/p-610103-46-5白色晶體或無(wú)定形粉末。微溶于水(溶解度0.0025g/100ml水),宜春磷酸鈣多少錢(qián),易溶于稀鹽酸和,不溶于乙醇和。 7758-87-4白色晶體或無(wú)定形粉末。 微溶于水(溶解度0.0025g/100ml水),易溶于稀鹽酸和,不溶于乙醇和。
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