武漢貝科新肽公司-蛋白互作

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：593784258 更新時(shí)間：2025-03-14

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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洋蔥亞細(xì)胞定位如何定位重要細(xì)胞器亞細(xì)胞定位辦法就是用來(lái)肯定細(xì)胞內(nèi)分子在細(xì)胞中的位置的一種辦法。如何使用熒光顯微鏡技術(shù)來(lái)定位洋蔥細(xì)胞中的一些重要細(xì)胞器。

植物細(xì)胞是由許多不同的細(xì)胞器組成的，這些細(xì)胞器在細(xì)胞內(nèi)扮演著不同的角色。為了研究這些細(xì)胞器的功能和位置，蛋白互作，科學(xué)家們使用各種技術(shù)來(lái)對(duì)它們進(jìn)行定位。其中一種常用的技術(shù)是熒光顯微鏡技術(shù)，它可以通過標(biāo)記特定的蛋白質(zhì)或化合物來(lái)觀察它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)的位置。

禾谷菌 CgRab5A 的亞細(xì)胞定位研究：劉涵等人利用多片段一步法將 CgRab5A 自身啟動(dòng)子、GFP 片段和 CgRab5A 開放閱讀框（ORF）片段到 pKNT 載體上，轉(zhuǎn)化型禾谷菌的原生質(zhì)體后，通過共聚焦顯微鏡觀察 GFP-CgRab5A 在菌絲和孢子內(nèi)的定位情況。結(jié)果表明，GFP-CgRab5A 在菌絲和孢子細(xì)胞內(nèi)均呈點(diǎn)狀分布，定位于早期內(nèi)涵體上。

水稻 OsUF 的亞細(xì)胞定位：丁作美等人通過得到水稻 E3 泛素連接酶 — 泛素融合蛋白（OsUF）基因的 cDNA 序列，并利用 Gateway 同源重組體系將 OsUF cDNA 全長(zhǎng)重組到融合表達(dá)綠色熒光蛋白（GFP）的表達(dá)載體上，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行亞細(xì)胞定位。結(jié)果顯示，OsUF 蛋白定位在細(xì)胞核。

為什么不先對(duì)一個(gè)基因做預(yù)測(cè)，在預(yù)測(cè)的結(jié)果上直接做共定位？

不同的預(yù)測(cè)網(wǎng)站有不同的計(jì)算方法，同一個(gè)基因在不同的預(yù)測(cè)網(wǎng)站也可能得出不同的定位結(jié)果。另外所有的結(jié)果都應(yīng)是基于實(shí)驗(yàn)得到的，對(duì)于不清楚可能定位在哪里的基因，一般推薦先做普通定位，根據(jù)普通定位的結(jié)果再?zèng)Q定做哪種細(xì)胞器的共定位。

為什么有的基因做原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化時(shí)熒光蛋白不亮？

不同物種的細(xì)胞可能對(duì)基因表達(dá)有影響，當(dāng)在一種材料的原生質(zhì)體中觀察不到熒光時(shí)，可以考慮換一種受體材料。另外，如果是分泌蛋白，在原生質(zhì)體中無(wú)法觀察到熒光，此時(shí)可以考慮注射葉片來(lái)觀察熒光。

拍攝時(shí)為什么有明場(chǎng)通道？

（1）顯示細(xì)胞狀態(tài)，有活力的原生質(zhì)體細(xì)胞應(yīng)該是飽滿圓潤(rùn)的，變形或破碎的細(xì)胞說(shuō)明此時(shí)細(xì)胞不是適狀態(tài)或細(xì)胞已。

（2）顯示熒光確實(shí)是細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)的，而不是細(xì)胞碎片及雜質(zhì)產(chǎn)生的雜光。

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